Tese

Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos (2022)

• Authors:
  • Cortez, Anelyse Abreu
  • Polikarpov, Igor (Orientador)
• Autor USP: CORTEZ, ANELYSE ABREU - IFSC
• Unidade: IFSC
• Sigla do Departamento: FCM
• DOI: 10.11606/D.76.2022.tde-03012023-153143
• Subjects: BIOFILMES; ENZIMAS
• Keywords: Biofilme dental; Dental biofilm; Glucanase; Sinergismo; Synergism
• Agências de fomento:
  • Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
  • Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
  • Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Language: Português
• Abstract: Biofilmes dentais caracterizam um problema de saúde oral pois podem culminar no desenvolvimento de cáries e outras doenças bucais bastante onerosas. Seus principais constituintes são os polissacarídeos extracelulares insolúveis. Tais componentes estão diretamente relacionados com a cariogenicidade das comunidades bacterianas e são formados por ligações glicosídicas (1 → 3)- α e (1 → 6)- α.Considerando a estrutura química dessas moléculas e sua importância para o biofilme dental, o emprego de enzimas exógenas capazes de clivar essas ligações glicosídicas, denominadas glucanases, se mostra uma estratégia promissora para o controle desses biofilmes. No presente trabalho, uma (1 → 3)- α (PmGH87) e uma (1 → 6)-α (CoGH66) glucanase de Prevotella melaninogenica e Capnocytophaga ochraceae, respectivamente, foram clonadas e expressas heterologamente. Após sua purificação, as condições ótimas de pH e temperatura para a atividade catalítica de cada enzima foram determinadas, bem como sua termo estabilidade estrutural em diferentes tampões e pHs. Através de modelagem preditiva, as estruturas tridimensionais de ambas as enzimas foi avaliada. Por fim, a atividade dessas glucanases na inibição da formação e degradação de biofilmes pré-formados de Streptococcus mutans crescidos em meio de cultura contendo 0,1 ou 1% de sacarose foi avaliada em termos de quantificação de biomassa total, polissacarídeos insolúveis, microscopia confocal e produto dhidrólise. Os resultados sugerem que tanto a PmGH87 quanto a CoGH66 são capazes de inibir a formação dos biofilmes crescidos em condição limitada ou abundante de sacarose. Entretanto, a combinação de ambas não resulta em efeito sinérgico. Os dados de degradação de biofilmes pré-formados apontam um efeito tempo-dependente para o tratamento com cada enzima sozinha. Além disso, observou-se um efeito sinérgico e dose-dependente proveniente do tratamento enzimático combinado das glucanases, onde a maior degradação observada foi de 95,5% em 30 minutos de tratamento para o biofilme crescido em baixa concentração de sacarose, e 93,8% após 2 horas de tratamento para o biofilme crescido em condição abundante do açúcar, cujos graus de sinergismo calculados foram de 5,54 e 3,18, respectivamente. Em conclusão, ambas as glucanases estudadas neste trabalho são efetivas na inibição da formação e na degradação de biofilmes previamente formados de S. mutans. Esses resultados são essenciais para o desenvolvimento de aplicações biotecnológicas e biomédicas que visam o controle de biofilmes bacteriano
• Imprenta:
  • Publisher place: São Carlos
  • Date published: 2022
• Data da defesa: 31.10.2022

Informações sobre o DOI: 10.11606/D.76.2022.tde-03012023-153143 (Fonte: oaDOI API)
• Este periódico é de acesso aberto
• Este artigo é de acesso aberto
• URL de acesso aberto
• Cor do Acesso Aberto: gold
• Licença: cc-by-nc-sa

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• ABNT

  CORTEZ, Anelyse Abreu. Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos. 2022. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2022. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/. Acesso em: 23 maio 2024.

• APA

  Cortez, A. A. (2022). Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/

• NLM

  Cortez AA. Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos [Internet]. 2022 ;[citado 2024 maio 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/

• Vancouver

  Cortez AA. Produção, caracterização e aplicação de diferentes classes de enzimas com potenciais biotecnológicos e biomédicos [Internet]. 2022 ;[citado 2024 maio 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76133/tde-03012023-153143/

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