Avaliação dos desfechos de infecção in vitro e em modelo experimental no hamster com diferentes isolados clínicos de Leishmania infantum (2022)
- Authors:
- Autor USP: VALERIANO, KAROLINE CAMILA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- DOI: 10.11606/D.17.2022.tde-08082022-090326
- Subjects: LEISHMANIOSE VISCERAL; ANIMAIS DE LABORATÓRIO; CITOCINAS; INFECÇÕES POR PROTOZOÁRIOS
- Keywords: Cepas clínicas; Clinical strains; Glicosilação; Glycosylation; Hamster Mesocricetus auratus; Infecção; Infection; Leishmaniose visceral; Mesocricetus auratus hamster; Visceral leishmaniasis
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A leishmaniose visceral (LV) é uma doença grave causada pelo protozoário Leishmania infantum, o qual é transmitido, durante o repasto sanguíneo, pelo inseto fêmea flebotomineo contaminado. A doença possui um período de incubação assintomático com duração variável, podendo resultar em doença ativa e, se não tratada, pode ser fatal. A liberação de múltiplas citocinas e moléculas inflamatórias conhecido como "tempestade de citocinas" é uma característica comum à LV, no entanto, as alterações no perfil de N-glicana da porção Fc de IgG já foi uma característica relacionada à gravidade da doença. Neste estudo o objetivo foi caracterizar a infecção de diferentes cepas clínicas de Leishmania chamadas 1686, 1851, 515, 1580 oriundas da infecção de humanos diagnosticados com LV, e a cepa de referência NCL IOCL 3241; in vitro com macrófagos de linhagem J774 e in vivo com hamster Mesocricetus auratus. No pico de crescimento de cada cepa macrófagos J774 foram infectados com taxa de infecção avaliada em 24, 48 e 72 horas. In vivo, hamters foram infectados por via intracardíaca e eutanasiados quando apresentaram perda de 20% do peso corporal e/ou sinais clínicos sugestivos de LV. Posteriormente soro, fígado e baço foram coletados para titulação, análise de glicanas em IgG total, carga parasitária por diluição limitante e qPCR, verificação do parasito por cPCR, "imprint", quantificação de citocinas por qPCR e alterações anatopatológicas nos órgãos. Nossos resultados mostraram que a maior taxa de infecção in vitro foi com a cepa 1686; já in vivo a cepa 1686, 1580 e 1851 induziram sinais clínicos graves nos animais com alterações histológicas, macroscópicas e alta quantidade de anticorpos, com taxa de sobrevivênciade 0%, 25% e 20%, respectivamente. A cepa 1580 induziu os primeiros sinais clínicos nos animais e apresentou maior carga parasitária em diluição limitante, entretanto a cepa 1686 induziu sinais clínicos em todos os animais com aumento da taxa de infecção em qPCR e alteração patológicas em fígado e baço. Já as cepas NCL IOCL 3241 e 80% dos hamsters infectados com a cepa 515 permaneceram assintomáticos; embora em todos infectados com 515 foi possível observar amastigotas em "imprint" de fígado e baço, enquanto os infectados com NCL IOCL 3241 mostraram apenas vacúolos parasitóforos vazios. Ambos os grupos tiveram alteração na glicosilação nos anticorpos desses animais. Desta forma, a cepa 1686 levou a um quadro clínico grave com maior infectividade tanto in vitro como in vivo, enquanto a cepa de referência NCL IOCL 3241 apresentou baixa infecção in vitro e apenas casos assintomáticos; e com diminuição na sialilação e fucosilação de IgG total. Além disso a baixa expressão de citocinas IL- 1ß hepática parece estar relacionada com a sintomatologia da LV. Por fim, reafirmamos a utilização do hamster como modelo experimental e a utilização de novas cepas como ferramentas de estudos da patologia da doença. E, para maior aprofundamento do estudo, sugerimos a duplicação do experimento e aplicação de técnicas mais sensíveis para análise das glicanas em IgG
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2022
- Data da defesa: 13.05.2022
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- Este artigo é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
VALERIANO, Karoline Camila. Avaliação dos desfechos de infecção in vitro e em modelo experimental no hamster com diferentes isolados clínicos de Leishmania infantum. 2022. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2022. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-08082022-090326/. Acesso em: 04 jun. 2024. -
APA
Valeriano, K. C. (2022). Avaliação dos desfechos de infecção in vitro e em modelo experimental no hamster com diferentes isolados clínicos de Leishmania infantum (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-08082022-090326/ -
NLM
Valeriano KC. Avaliação dos desfechos de infecção in vitro e em modelo experimental no hamster com diferentes isolados clínicos de Leishmania infantum [Internet]. 2022 ;[citado 2024 jun. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-08082022-090326/ -
Vancouver
Valeriano KC. Avaliação dos desfechos de infecção in vitro e em modelo experimental no hamster com diferentes isolados clínicos de Leishmania infantum [Internet]. 2022 ;[citado 2024 jun. 04 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-08082022-090326/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.17.2022.tde-08082022-090326 (Fonte: oaDOI API)
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