Expressão de proteínas estruturais de Alphavirus em células S2 (D melanogaster) (2018)
- Authors:
- Autor USP: PUGLIA, ANA LIA PRADELLA - BIOTECNOLOGIA
- Unidade: BIOTECNOLOGIA
- Subjects: DROSOPHILA; MOSQUITOS; VÍRUS CHIKUNGUNYA; AEDES; PROTEÍNAS; WESTERN BLOTTING; MICROSCOPIA ELETRÔNICA ANIMAL
- Keywords: Alphavirus; Alphavirus; células S2; Chikungunya; Chikungunya; Mayaro; Mayaro; S2 cells; VLP
- Language: Português
- Abstract: No grupo das doenças infecciosas emergentes e reemergentes, os arbovírus transmitidos por mosquitos, são considerados importantes desafios para a saúde pública. O alastramento mundial do vírus Chikungunya (CHIKV, Togaviridae, Alphavirus), acabou resultando na introdução do CHIKV no Brasil, através da transmissão zoonótica por mosquitos do gênero Aedes spp, particularmente Ae. aegypti e Ae. albopictus, duas espécies invasoras e cosmopolitas. Outro Alphavirus, o vírus Mayaro (MAYV) presente na região amazônica da América do Sul, vem apresentando indícios de uma real urbanização, elevando a preocupação sobre sua possível transmissão por mosquitos urbanos. Diante desse cenário, fica clara a necessidade da realização de estudos sobre estratégias de controle e prevenção da infecção por MAYV e CHIKV, uma vez que não há vacinas ou terapia antiviral específica para a infecção por esses arbovírus. Este projeto descreve pela primeira vez a eficiente expressão, purificação e análise de partículas semelhantes a vírus (VLP, virus-like particles) dos Alphavirus CHIKV e MAYV em células de inseto S2 (Drosophila melanogaster).Para esse fim, clonamos os genes das proteínas estruturais dos vírus MAYV e CHIKV em vetores para a expressão recombinante em células S2. Essa plataforma de expressão de proteínas provou ser adequada para o processamento de glicoproteínas do CHIKV e MAYV para produção de VLP, uma vez que detectamos a presença de partículas no sobrenadante do cultivo por Western blottingEssa plataforma de expressão de proteínas provou ser adequada para o processamento de glicoproteínas do CHIKV e MAYV para produção de VLP, uma vez que detectamos a presença de partículas no sobrenadante do cultivo por Western blotting e Microscopia eletrônica de transmissão (TEM). Ainda, foi possível selecionar células para uma maior produção de VLP e estabelecer um método de purificação das partículas
- Imprenta:
- Data da defesa: 29.08.2018
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ABNT
PUGLIA, Ana Lia Pradella. Expressão de proteínas estruturais de Alphavirus em células S2 (D melanogaster). 2018. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-30052019-143014/. Acesso em: 05 jun. 2024. -
APA
Puglia, A. L. P. (2018). Expressão de proteínas estruturais de Alphavirus em células S2 (D melanogaster) (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-30052019-143014/ -
NLM
Puglia ALP. Expressão de proteínas estruturais de Alphavirus em células S2 (D melanogaster) [Internet]. 2018 ;[citado 2024 jun. 05 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-30052019-143014/ -
Vancouver
Puglia ALP. Expressão de proteínas estruturais de Alphavirus em células S2 (D melanogaster) [Internet]. 2018 ;[citado 2024 jun. 05 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-30052019-143014/
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