Avaliação da coleta de sangue em papel de filtro para diagnóstico molecular da dengue (2010)
- Authors:
- Autor USP: RODRIGUES, CÉLIA LUIZA DE LIMA - FM
- Unidade: FM
- Sigla do Departamento: MIP
- Subjects: DENGUE (DIAGNÓSTICO); REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; CORANTES FLUORESCENTES; PUNÇÕES
- Language: Português
- Abstract: O diagnóstico rotineiro da dengue é realizado com amostra de sangue dos casos suspeitos. A coleta tradicional de sangue (por punção venosa) é um procedimento que dificulta a realização de exames e pesquisas por ser um procedimento invasivo que nem sempre é prático para crianças e bebês, requer pessoal especializado e necessita de um local para armazenamento da amostra sob refrigeração ou congelamento. O propósito deste estudo foi coletar amostras por punção digital com uma nova tecnologia (FTA Card) e compará-la com amostras coletadas por punção venosa, avaliando-as através de uma técnica molecular de PCR em tempo real. Sendo o PCR em Tempo Real a técnica molecular atualmente disponível de maior rapidez, sensibilidade e especificidade, padronizamos uma metodologia de passo único de PCR em Tempo Real com SYBR green baseando-se na região 3 não codificante do vírus e utilizando primers degenerados, capazes de detectar os quatro sorotipos de uma só vez. A avaliação das técnicas de coleta e amplificação foram feitas com amostras suspeitas de dengue, obtidas em Goiânia durante surto ocorrido no ano de 2008. O limite de detecção da reação padronizada no presente estudo foi de aproximadamente 100 cópias/ml e uma especificidade de 100%. Para tipagem das amostras positivas a técnica empregada foi o PCR multipex. Dentre as 89 amostras coletadas 60 (67%) foram positivas para àquelas coletadas por punção venosa e 14 (16%) para àquelas coletadas por punção digital. Dentre as 89 amostras para o PCR em Tempo Real, apenas 29 (32%), foram tipadas pelo método de PCR multiplex, sendo 3 casos do vírus da dengue 1 (10%), 16 casos do vírus da dengue 2 (55%), e 10 casos do vírus da dengue 3 (35%). Descritores: Dengue/diagnóstico, coleta de amostras sanguíneas, reação em cadeia da polimerase, corantes fluorescentes
- Imprenta:
- Data da defesa: 21.10.2010
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ABNT
RODRIGUES, Célia Luiza de Lima. Avaliação da coleta de sangue em papel de filtro para diagnóstico molecular da dengue. 2010. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2010. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-23112010-174300/. Acesso em: 03 jun. 2024. -
APA
Rodrigues, C. L. de L. (2010). Avaliação da coleta de sangue em papel de filtro para diagnóstico molecular da dengue (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-23112010-174300/ -
NLM
Rodrigues CL de L. Avaliação da coleta de sangue em papel de filtro para diagnóstico molecular da dengue [Internet]. 2010 ;[citado 2024 jun. 03 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-23112010-174300/ -
Vancouver
Rodrigues CL de L. Avaliação da coleta de sangue em papel de filtro para diagnóstico molecular da dengue [Internet]. 2010 ;[citado 2024 jun. 03 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5134/tde-23112010-174300/
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